日(rì)糧添加複合益生(shēng)菌對羔羊生(shēng)長性能及免疫功能的影(yǐng)響

　　爲解決養殖過程中濫用抗生(shēng)素現象，飼料中全面禁止添加促生(shēng)長類抗生(shēng)素新規于2019年(nián)7月下發，該規定實施後，哺乳羔羊腹瀉率明顯升高，制約了羊産業發展(朱振宇等,2022)。在此背景下，爲降低羔羊患病率和死亡率，确保我國(guó)羊産業穩定發展，尋找抗生(shēng)素替代品成爲必然趨勢。有學者研究在飼糧中添加枸杞多糖對羔羊血清免疫指标、能量代謝、營養物質表觀消化率的影(yǐng)響(劇(jù)浩等，2022)。還(hái)有學者研究添加岩藻多糖對羔羊髒器功能(王嘉麟等，2022)、免疫功能(車小蛟等,2022)等指标的影(yǐng)響。近年(nián)來(lái)，關于在日(rì)糧中添加複合益生(shēng)菌的相(xiàng)關報道不斷增多。如(rú)2016年(nián)就(jiù)有學者研究富硒益生(shēng)菌、亞硒酸鈉對羔羊生(shēng)長發育以及相(xiàng)關指标的影(yǐng)響(秦順義等，2016)。任建存等(2021)将關中奶山(shān)羊作(zuò)爲研究對象，分(fēn)析酵母培養物對其羔羊生(shēng)長性能及血液生(shēng)化指标的影(yǐng)響。鑒于目前日(rì)糧添加複合益生(shēng)菌的研究多以肉仔雞、斷奶仔豬、肉鵝等動物爲主，本研究通過試驗分(fēn)析添加不同比例複合益生(shēng)菌對哺乳羔羊飼養的影(yǐng)響，旨在爲羔羊養殖獲得(de)更多數據參考。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料來(lái)源

　　複合益生(shēng)菌以乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌組成，由某農大(dà)實驗室分(fēn)離(lí)并進行保存。其中，乳酸杆菌在MRS培養基中，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌在NB培養基中，均在溫度37℃、180r/min搖床培養24 h。前期按照(zhào)乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌1∶1∶4的比例進行混合，活菌數量達到108CFU/g。發酵飼料由15%麸皮+25%豆粕+60%玉米組成，含水量45%,在恒溫30℃的密封袋中連續發酵2周。發酵顆粒飼料組成和營養水平詳見(jiàn)表 1.

　　表1 發酵飼料組成及營養水平（風(fēng)幹基礎）　　

　　注：營養水平除代謝能爲計(jì)算數值外，其餘均爲實測值。

　　在試驗過程中，爲确保最佳飼用效果，開封後的飼料在室溫下儲存時間≤2周，未開封飼料整體(tǐ)儲存期≤4周。試驗期間，共制作(zuò)3批次發酵飼料，并對每個批次進行檢驗，确保檢測和試驗結果的準确性。

　　1.2 試驗動物分(fēn)組與設計(jì)

　　試驗選擇72隻遺傳、生(shēng)長背景一緻的健康哺乳期羊羔，公母各占50%。所有參與本試驗的羔羊均爲15日(rì)齡。随機(jī)分(fēn)組。每組公母數量一緻，共4個組别，每組18個重複。各組試驗動物均随母哺乳飼養，同時補飼發酵顆粒日(rì)糧。對照(zhào)組日(rì)糧中不含有複合益生(shēng)菌，試驗1組飼喂含有5%複合益生(shēng)菌的發酵飼料，試驗2組飼喂含有10%複合益生(shēng)菌的發酵飼料，試驗3組飼喂含有15%複合益生(shēng)菌的發酵飼料。預飼期爲5d，正試期40 d。

　　1.3 飼養管理(lǐ)

　　本試驗開始前徹底對羊舍進行清洗、消毒，試驗期間樣本羔羊随母哺乳，在母子欄中飼養，其中羔羊欄規格爲2.8m×2.0m×0.8m，在母羊欄和羔羊欄中間設置小門(mén)。羔羊可(kě)随意進出，母羊則無法進入到羔羊欄中。每天定時飼喂，分(fēn)别于07:00和17:00.确保各組飼養環境 、管理(lǐ)條件(jiàn)相(xiàng)同，所有試驗動物自(zì)由采食和自(zì)由飲水。

　　1.4 指标測定

　　1.4.1 生(shēng)長性能

　　試驗期間，每日(rì)記錄給料量、餘料量、損耗量，計(jì)算采食量。分(fēn)别于試驗第1天和試驗第40天進行空腹稱重，計(jì)算日(rì)平均采食量、日(rì)平均增重，計(jì)算方法如(rú)下：

　　日(rì)平均采食量(g/d)=(給料量-餘料量)/總試驗天數;

　　日(rì)平均增重(g/d)=(末重-初始重)/總試驗天數。

　　1.4.2 免疫功能指标

　　試驗結束後測定4組羔羊血清免疫指标水平，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定免疫球蛋白(bái)G(IgG)、免疫球蛋白(bái)A(IgA)、免疫球蛋白(bái)M(IgM)含量，采血前需禁食，在空腹狀态下于次日(rì)清晨采集，完成血液樣本采集後嚴格按照(zhào)ELISA試劑盒進行操作(zuò)。

　　1.5 統計(jì)學方法

　　采用Excel表格對數據進行整理(lǐ)，采用SPSS25.0軟件(jiàn)進行單因素方差分(fēn)析。采用Duncan's進行多重比較，結果用“`X±s”表示，P<0.05表示組間差異顯著，P<0.01 則表示組間差異極顯著。

　　2 結果

　　2.1 複合益生(shēng)菌對羔羊生(shēng)長性能的影(yǐng)響

　　由表2可(kě)知，各組末重、日(rì)平均采食量、日(rì)平均增重由高到低的排序均爲試驗2組>試驗1組>試驗3組>對照(zhào)組。其中，在末重、日(rì)平均采食量對比上，試驗1組、試驗2組顯著高于對照(zhào)組、試驗3組(P<0.05)，但(dàn)試驗1組和試驗2組之間無顯著差異(P>0.05)，對照(zhào)組和試驗3組差異不顯著(P>0.05);試驗1組日(rì)平均增重顯著高于對照(zhào)組(P<0.05)，試驗2組極顯著高于對照(zhào)組(P<0.01)，試驗3組與對照(zhào)組之間無顯著差異(P>0.05)。

　　表2 日(rì)糧中添加不同比例複合益生(shēng)菌發酵飼料對羔羊生(shēng)長性能的影(yǐng)響

　　注：同列數據肩标不同小寫字母者表示差異顯著(P<0.05)，同列肩标不同大(dà)寫字母者表示差異極顯著(P<0.01)，下同。

　　2.2 複合益生(shēng)菌對羔羊免疫功能指标的影(yǐng)響

　　由表3可(kě)知，試驗1、2組IgG 含量顯著高于對照(zhào)組(P<0.05)和試驗3組(P<0.05)，對照(zhào)組和試驗3組無顯著差異(P>0.05);試驗2組IgM含量顯著高于試驗1組(P<0.05)，極顯著高于對照(zhào)組和試驗3組(P<0.01)，試驗1組顯著高于對照(zhào)組(P<0.05);各組IgA含量比較均無顯著差異(P>0.05)。

　　表3 日(rì)糧添加不同水平比例益生(shēng)菌對羔羊血清免疫功能指标水平的影(yǐng)響 μg/ml　　

　　3 討(tǎo)論

　　3.1 不同比例複合益生(shēng)菌對羔羊生(shēng)長性能的影(yǐng)響

　　飼養羔羊過程中，人(rén)們發現飼料經過益生(shēng)菌發酵後可(kě)以産生(shēng)大(dà)量有機(jī)酸，以乳酸最爲典型，使原有飼料呈酸香味。随着相(xiàng)關研究的不斷深入。普遍認爲，适當添加複合益生(shēng)菌不僅能提高飼料适口性，同時也能顯著增加羔羊進食量，但(dàn)如(rú)果過量添加，羔羊采食量則會呈下降趨勢(郭文亮等.2022)。秦順義等(2014)研究表明，與對照(zhào)組相(xiàng)比，複合益生(shēng)菌組羔羊平均末重和日(rì)平均增重分(fēn)别提升了1.94% 、14.08%，證實添加複合益生(shēng)菌的飼料對羔羊生(shēng)長性能有明顯促進作(zuò)用。盧馬甯等(2021)研究表明，在4～5月齡羔羊日(rì)糧中添加優化後的複合益生(shēng)菌、氨基酸，羔羊日(rì)平均采食量明顯增加，但(dàn)應将複合益生(shēng)菌添加比例控制在40%以下。在本研究中，10%複合益生(shēng)菌組(試驗2組)與5%複合益生(shēng)菌組(試驗1組)的末重和日(rì)平均采食量無顯著差異，但(dàn)兩組均顯著高于添加15%複合益生(shēng)菌組(試驗3組)和對照(zhào)組，說(shuō)明添加不同比例複合益生(shēng)菌會對羔羊采食量及末重産生(shēng)影(yǐng)響，影(yǐng)響最大(dà)的是10%複合益生(shēng)菌組，這與丁亞偉等(2022)的研究結果一緻。本試驗10%複合益生(shēng)菌組日(rì)平均增重顯著高于5%複合益生(shēng)菌組，極顯著高于15%複合益生(shēng)菌組和對照(zhào)組，5%組日(rì)平均增重顯著高于15%複合益生(shēng)菌組和對照(zhào)組，說(shuō)明當複合益生(shēng)菌添加比例達到15%後，羔羊日(rì)平均增重不再增加，反而降至不添加複合益生(shēng)菌水平。綜上所述，日(rì)糧添加10%複合益生(shēng)菌對羔羊生(shēng)長性能産生(shēng)的積極影(yǐng)響最大(dà)。

　　3.2 不同比例複合益生(shēng)菌對羔羊免疫功能指标的影(yǐng)響

　　血清免疫球蛋白(bái)指标包括IgG、IgM、IgA等，上述指标水平可(kě)反映動物的全身(shēn)免疫功能。在免疫球蛋白(bái)指标中，IgG 含量最高，是動物機(jī)體(tǐ)二次體(tǐ)液免疫的關鍵指标。IgM屬于動物血液中的黏附抗體(tǐ)，能發揮強大(dà)的殺菌作(zuò)用。而IgA則直接參與動物的黏膜免疫反應，是局部抗感染過程的重要參與者。研究證實，巨噬細胞在免疫應答反應中發揮關鍵作(zuò)用，益生(shēng)菌超強的黏附力使其對腸道菌群平衡産生(shēng)調節作(zuò)用，可(kě)顯著增加黏膜底層免疫細胞數量，提高血液抗體(tǐ)水平,從(cóng)而增加血清IgG含量，即益生(shēng)菌調節炎症反應可(kě)能是通過影(yǐng)響巨噬細胞極化來(lái)實現的(段冰潔等，2021 )。王福剛(2022)研究發現，10%複合益生(shēng)菌培養物可(kě)顯著提高肉羊血清IgG含量。本試驗表明，10%複合益生(shēng)菌組羔羊血清中IgG含量最高，其次是添加5%複合益生(shēng)菌，而15%複合益生(shēng)菌組未明顯增加羔羊血清中IgG含量，與上述報道一緻，而出現差異的原因可(kě)能是添加過高比例複合益生(shēng)菌的發酵飼料可(kě)對動物機(jī)體(tǐ)産生(shēng)促炎作(zuò)用，反而降低了羔羊的免疫力。在IgM、IgA含量比較上，權威文獻報道不同比例複合益生(shēng)菌未對IgM、IgA含量産生(shēng)明顯影(yǐng)響，其水平與對照(zhào)組基本持平(晨陽,2022)，本研究表明，各組IgA含量無顯著差異，但(dàn)10%益生(shēng)菌組可(kě)極顯著提升羔羊血清IgM含量，IgM含量出現差異的原因可(kě)能與試驗品種、日(rì)齡、試驗時間有關。

　　4 結論

　　在随母哺乳羔羊的補飼料顆粒中添加複合益生(shēng)菌可(kě)提高羔羊生(shēng)長性能，并對提高羔羊免疫力有一定幫助，但(dàn)需要注意添加比例。在本試驗條件(jiàn)下，添加10%複合益生(shēng)菌可(kě)明顯提高羔羊末重、日(rì)平均采食量、日(rì)平均增重以及血清IgG、IgM水平。

文章(zhāng)來(lái)源：中國(guó)飼料